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杭州亞萊博儀器有限公司
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色譜柱的清洗和再生方法
點擊次數(shu)：3192 更新(xin)時間(jian)：2013-03-06
除非特殊說明，在所有情況下，所用溶(rong)劑的體積應該是色譜柱體積的40-60倍。
應在清(qing)洗(xi)過程開始(shi)和結束時各測一次柱(zhu)效(xiao)和容(rong)量因(yin)子(zi)等，比(bi)較(jiao)色譜柱(zhu)性能(neng)的改善(shan)，以確(que)定清(qing)洗(xi)的效(xiao)果(guo)。
確保色譜柱中沒有樣品和緩沖溶(rong)(rong)液，清(qing)洗前所用(yong)的(de)溶(rong)(rong)劑應(ying)與zui初清(qing)洗時所用(yong)的(de)溶(rong)(rong)劑相溶(rong)(rong)。
應確保實驗(yan)測試時所用的流(liu)動相(xiang)與色譜柱(zhu)中zui后的溶劑相(xiang)溶。
1正相填料
用四氫呋喃沖洗。
用(yong)甲醇沖洗。
用四氫呋喃沖(chong)洗。
二氯甲烷沖洗。
用無苯正己(ji)烷(wan)沖洗。
2反相填(tian)料
用HPLC級水沖洗(xi)，沖洗(xi)時(shi)進4等份的200μl的二(er)甲亞砜(feng)（DMSO）。
用甲醇沖洗。
用氯仿沖洗。
用甲醇沖洗。
3陰離子(zi)交換填料
用HPLC級水沖洗。
用甲醇沖(chong)洗。
用氯(lv)仿沖洗。
4 陽離子(zi)交換(huan)填料(liao)
用 HPLC 級水沖洗(xi)；在(zai)沖洗(xi)的過程中進(jin)4 等份200μl 的DMSO
四氫呋喃沖洗。
5 蛋白質凝膠(jiao)過濾填料
去除(chu)蛋白質(zhi)尺寸(cun)排阻介質(zhi)中的(de)污染(ran)物有兩種(zhong)清洗/再生(sheng)的(de)方法。
弱保留(liu)蛋白質(zhi)
用(yong)30moL/L pH3.0 磷(lin)酸鹽緩沖液(ye)沖洗。
強保留蛋白質
用100%的水到100%的乙腈梯(ti)度洗(xi)脫60min。
6多孔石墨化碳
多孔石墨碳有四種(zhong)再生(sheng)的方(fang)法，選用哪一(yi)種(zhong)方(fang)法依(yi)賴于被分析物和所(suo)用的溶(rong)劑。
酸堿再生
適合于使用極(ji)性流動(dong)相(xiang)分析(xi)(xi)離(li)子類分析(xi)(xi)物。
將色譜柱(zhu)倒裝
用50ml含0.1%三F乙酸的四氫(qing)呋喃／水（1:1）溶液1ml/min流速(su)沖冼。
用50ml含0.1%三乙胺或氫氧(yang)化鈉的四氫呋喃／水（1:1）溶液1ml/min流(liu)速沖冼。
用50ml含0.1%三F乙(yi)酸的四氫呋喃／水（1:1）溶(rong)液1ml/min流(liu)速(su)沖冼。
用(yong)95%甲醇水(shui)溶液(ye)沖洗重新平衡。
將色(se)譜柱改為正向。
作者(zhe)：英國的R.Plumb-Glaxo
強(qiang)有機溶劑再生
適(shi)合于(yu)水(shui)相分(fen)析(xi)極性(xing)或離子類(lei)分(fen)析(xi)物(wu)。
用50ml丙酮以1ml/min流速沖洗。
用120ml二丁(ding)醚以1ml/min流(liu)速沖(chong)洗。
用50ml丙酮以(yi)1ml/min流速沖洗。
用水(shui)沖冼(xian)至平(ping)衡。
正相(xiang)再生
適合于(yu)主要使(shi)用正相流動相的多孔(kong)石墨化碳(tan)柱。
用50ml二氯甲烷以1ml/min流速沖洗。
用50ml甲醇以1ml/min流速沖洗(xi)。
用50ml水(shui)以1ml/min流速(su)沖洗。
用50ml 0.1mol/L鹽酸(suan)以1ml/min流速沖洗。
用50ml水以(yi)流(liu)速(su)1ml/min沖洗(xi)。
用(yong)50ml甲醇(chun)以1ml/min流速沖洗(xi)。
用50ml二(er)氯甲烷(wan)以(yi)1ml/min流速沖洗。
用流(liu)動相沖冼至(zhi)平衡。
作(zuo)者(zhe)：瑞典的A.Karlsson-Uppsala
三F乙酸的去除
適合于流動相中含有(you)三F乙酸的多孔石(shi)墨化碳柱。
用(yong)加熱到75℃的乙腈沖洗，同時(shi)色譜(pu)柱也要保持在這一溫度。
7 帶金屬(shu)抗衡離子的(de)聚合物填料
基質是帶金屬抗(kang)衡離子的聚合(he)物色譜(pu)柱(zhu)，有三種再生方法(fa)，每種方法(fa)詳細列于下(xia)表(biao)：
| 色(se)譜柱類型 | 金屬(shu)污染物 | 有機污染物 | 色譜柱清冼 |
| 氫離(li)子型 | 用25℃的0.1mol/L的H2SO4溶液以(yi)0.1ml/min的流速反(fan)向沖(chong)冼4—16小(xiao)時 | 用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向沖冼4小時 | 用65℃的20:80的ACN:0.01NH2SO4溶液以0.1ml/min的流速反向沖冼4小時 |
| 鈣離(li)子型 | 用25℃的(de)(de)0.1mol/L pH6.3的(de)(de)Ca（NO3）2溶液以0.1ml/min的(de)(de)流速反向沖冼(xian)4—16小時(shi) | 用25℃的20:80的乙腈水(shui)溶液以(yi)0.1ml/min的流(liu)速(su)反向沖冼4小時 | 用25℃的20:80的乙腈(jing)水溶液以(yi)0.1ml/min的流速反向沖冼(xian)4小時 |
| 鈉離子(zi)型(xing) | 用85℃的(de)0.1mol/L 的(de)NaNO3溶液以(yi)0.1ml/min的(de)流速反(fan)向沖冼4—16小時 | 用25℃的(de)20:80的(de)乙腈水溶(rong)液以0.1ml/min的(de)流速反相沖冼4小時 | 用25℃的20:80的乙腈水溶液(ye)以0.1ml/min的流(liu)速反向沖(chong)冼4小時 |
| 銀離(li)子(zi)型(xing) | 沒有再生(sheng)過(guo)程的報導。 | 用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向沖(chong)冼(xian)4小時 | 用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向沖冼4小時 |
| 鉛離子型 | 用85℃的pH 5.3的0.1M Pb（NO3）2溶液以0.1ml/min的流(liu)速(su)反(fan)向沖冼4—16小時 | 用(yong)25℃的(de)20:80的(de)乙腈(jing)水溶液以0.1ml/min的(de)流速反向(xiang)沖冼4小時(shi) | 用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向沖(chong)冼(xian)4 |